HEPATITE B: GENOTIPAGEM

 

 

 

AMOSTRA

Plasma com anticoagulante EDTA. 2,0 ml.

 

ATENDIMENTO

Em todas as unidades. Tem restrição de cobertura por convênios. É necessário que o cliente tenha resultado de exame de carga viral (PCR quantitativo) recente, com resultado superior a 1.000 cópias⁄ml. Solicitar cópia do exame caso ele tenha sido realizado em outro laboratório.

 

PREPARO DO PACIENTE

Jejum não obrigatório.

 

COLETA

Colher 5,0 ml de sangue em tubo a vácuo EDTA-PPT-RB com gel separador, rolha branca. Centrifugar o tubo EDTA-PPT-RB a 3.000 rpm durante 10 minutos para que ocorra a gel-separação. Manter as amostras refrigeradas, sem contato direto com o gelo, até a realização do exame. A coleta deve ser realizada de segunda a sexta-feira até 11:00h. Não colher em véspera de feriados. Estabilidade da amostra: 48 horas.

 

MÉTODO

Reação em cadeia da polimerase - PCR.

 

VALOR REFERENCIAL

Ausência de mutações que conferem resistência aos antivirais.

 

INTERPRETAÇÃO

Exame útil na avaliação de pacientes que não respondem adequadamente ao tratamento ao tratamento antiviral. O surgimento de mutações no gene da DNA polimerase do HBV leva à resistência aos antivirais, permitindo o reaparecimento do DNA do vírus no soro, principalmente em indivíduos submetidos a terapia prolongada. As mutações associadas a resistência ao tratamento antiviral são: -Mutação L528M: A substituição do aminoácido leucina (L) pela metionina (M) na posição 528 na proteina da DNA polimerase leva a redução de 18 vezes na sensibilidade à lamivudina e de 3 vezes ao famciclovir. -Mutação na região YMDD da DNA polimerase, posição 552: Mutação M552V: A substituição da metionina (M) pela valina (V) na posição 552 leva a uma redução de 150 a 300 vezes na sensibilidade à lamivudina. Mutação M552I: A substituição da metionina (M) pela isoleucina (I) na posição 552 está relacionada com uma resistência à lamivudina bastante acentuada, com redução de cerca de 10.000 vezes na sensibilidade.